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PCR實(shí)操避坑分享發(fā)布時間：2025-09-28

前段時間和大家分享了PCR反應(yīng)的過程控制，今天來聊聊PCR的操作手法。實(shí)操可以說是整個PCR實(shí)驗(yàn)流程中最容易被忽略卻又至關(guān)重要的一環(huán)。下面小編就來分享一下自己當(dāng)初的一些經(jīng)驗(yàn)心得，僅代表個人看法。先說體系配置（各組分分開，非預(yù)混液）。配置前先計(jì)算好所需要的各組分體積，統(tǒng)一配置好后再...

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2022
4-21

帶你全面了解移液器
移液器是實(shí)驗(yàn)室用于取樣和加液常用的精密量器，是量出式量器，分定量和可調(diào)兩種類型。移液器是指一支移液器的容量是固定的，而可調(diào)移液器的容量在其標(biāo)稱容量范圍內(nèi)連續(xù)可調(diào)。移液器使用時的注意事項(xiàng)(1)吸取液體時要緩慢均勻，避免液體濺到移液桿上。(2)...
2022
4-19

核酸提取儀使用注意事項(xiàng)
核酸提取儀主要由磁套、磁棒、進(jìn)給板和步進(jìn)電機(jī)四個部分組成；磁套位于磁棒的下方且對齊形成一對互相配合使用，進(jìn)給板位于磁套的下方；磁套、磁棒和進(jìn)給板分別連接一個步進(jìn)電機(jī)；磁套和磁棒的步進(jìn)電機(jī)控制磁套和磁棒的上下相對運(yùn)動，與進(jìn)給板相接的步進(jìn)電機(jī)控...
2022
4-12

實(shí)時熒光定量PCR儀使用的基本步驟
實(shí)時熒光定量PCR儀技術(shù)的原理：體外核酸擴(kuò)增，加熱使雙鏈DNA解開螺旋，在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交，在TaqDNA聚合酶，dNTPs（脫氧核糖核苷三磷酸），Mg2+和合適pH緩沖液存在條件下延伸引物，重復(fù)“變性→退火一引物延伸”過...
2022
4-6

程序降溫盒使用經(jīng)驗(yàn)分析
程序降溫盒的使用方法直都搞不明白，覺得是不是應(yīng)該把程序降溫凍存盒先從-80度移到室溫放一段時間(細(xì)胞剛開始還沒凍的時候就是室溫)，然后把細(xì)胞放進(jìn)去，再一起移到-80度，這樣才能實(shí)現(xiàn)程序降溫呢?時間使用長了，感覺里面的液體是不是異丙醇啊，使用...
2022
3-23

三槽梯度PCR儀你真的了解嗎?
一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件（通常12種溫度梯度）的稱之為梯度PCR儀。通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增，從而一次性PCR擴(kuò)增就可以篩選出表達(dá)量高的適合退火溫度進(jìn)行有效的擴(kuò)增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增，這...
2022
3-16

程序降溫盒使用小技巧
程序降溫盒在沒有酒精或任何液體的情況下,能確保在低溫冰箱中樣品的降溫速率為-1℃/分鐘。它們可以運(yùn)用于各種細(xì)胞類型，包括干細(xì)胞，原代細(xì)胞和細(xì)胞系。這對于大多數(shù)需要培養(yǎng)的細(xì)胞系來說是非常理想的。已經(jīng)通過干細(xì)胞，原代細(xì)胞和細(xì)胞系的使用，證明了提...

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