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雙槽二維梯度PCR儀該如何設置合適的退火溫度?

更新時間:2021-12-18      點擊次數:2807
  雙槽二維梯度PCR儀就是將多個的PCR反應放在一起做,不用一次一次的作很多次,溫度梯度PCR可以很快的找出適合的退火溫度,或者說可以在適合的退火溫度下擴增出目的條帶。除具標準PCR儀功能外,其梯度模塊還能同時進行多達12個不同退火溫度的PCR反應,在梯度模塊上,可實現對梯度溫度和梯度寬度等參數的調整,自由編程12道溫度,梯度實現不同樣品的退火溫度并同時進行熱循環。僅一次實驗就能確定特定體系相應的退火溫度。從而可在短時間內對PCR實驗進行優化,大大提高PCR 科研效率。
  雙槽二維梯度PCR儀如何設置合適的退火溫度進行摸索。它是以合成引物的退火溫度為參考值,在進行同一個PCR反應時,同時設置多個退火溫度進行PCR實驗。這些退火溫度呈現梯度遞增或遞減,通過梯度PCR確定適合儀器的退火溫度。
  雖然我們可以通過梯度PCR摸索出適合儀器的退火溫度,但在實際應用中仍然會遇到諸多困難。例如我們在一臺PCR儀上摸索出合適的退火溫度,當換到另一臺儀器(同一型號)上進行相同PCR實驗時,有時獲得的結果會不理想;在一臺PCR儀摸索出的退火溫度,換到其它品牌或型號的PCR儀上時,獲得的結果也是不理想;使用一種耗材獲得好的實驗結果,當更換其它耗材時,同樣獲得不理想的結果等。遇到上述狀況時,有時研究人員往往會很困惑,這是什么原因造成的?如何解決呢?
  雙槽二維梯度PCR儀可領域于分子生物學、醫學、食品工業、司法科學、生物技術、環境科學、微生物學、臨床診斷、流行病學、遺傳學、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達等領域以聚合酶鏈式反應(Picymerase Chain Reaction , PCR)為特征的、以檢測DNA/RNA為目的的各種病原體檢測及基因分析。
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